考马斯亮蓝快速染色液(Coomassie Blue Fast Staining Solution)是以考马斯亮蓝G250为染料,可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白凝胶的无污染、快速、高灵敏染色,或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。18分钟即可检测到100ng条带,约40分钟可检测到10ng条带,约50分钟即可获得背景非常低的凝胶染色,约150分钟即可获得几乎完美的无背景染色的蛋白条带。
图1.蛋白凝胶加入50ml去离子水微波炉高火煮3min,换去离子水后再煮3min,摇床摇5min,染色30min,脱色2h后的效果图。蛋白(BSA)上样量如图中所示,清晰可见10ng条带,并且凝胶背景已经脱色至几乎完美的无色。 快速染色时,使用本考马斯亮蓝快速染色液染色和常规的考马斯亮蓝染色相比,效果基本一致,参考图2。
图2.碧云天考马斯亮蓝快速染色液(采用快速染色方法)和常规考马斯亮蓝法染色蛋白凝胶的染色效果对比。常规方法使用碧云天的考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)。蛋白样品为BSA,凝胶为12% SDS-PAGE。考马斯亮蓝快速染色液染色前,凝胶在去离子水中煮沸3min,摇床摇5min,然后用考马斯亮蓝快速染色液染色10min,再用去离子水脱色10min(不脱色也可以观察到类似条带,但背景会深一些)。
无需对蛋白和凝胶进行固定,可以不进行脱色,操作更加简单。
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