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Thermo Scientific VitroEase 缓冲液筛选试剂盒提供了预配制的缓冲液和洗涤剂以及全面的筛选策略，用于确定单颗粒冷冻电镜样品分析的最佳蛋白质条件。 VitroEase 缓冲液筛选试剂盒的特性包括： •易于使用—14种缓冲液和6种洗涤剂预先配制成 10X 浓缩液，可直接加入蛋白质样品中，几乎不需要稀释样品 • 快捷便利—缓冲液和洗涤剂提供了颜色编码的盖子，与颜色编码的筛选策略相对应 • 综合全面—优化的筛选策略包括两轮筛选，使用24个载网进行，并提供有故障排除建议 • 灵活实用—针对冷冻电镜样品制备提供有种类广泛的常用缓冲液和洗涤剂，足以对400个载网进行样品优化 • 经过验证—采用单粒子冷冻电镜分析验证组分和筛选策略 冷冻电镜样品筛选可评估各种缓冲液和添加剂条件下的蛋白质行为，最终目标是确定蛋白质在冰上稳定、随机定向和均匀分布的最佳条件。试剂盒提供的缓冲液 pH 值为3.6至8.9，预先混合了多种盐和二价阳离子。洗涤剂以 10X 浓缩液的形式提供，并附有易于使用的表格，可将体积换算为 CMC 浓度。 全面的样品筛选策略采用两轮筛选和24个载网，大约需要2天时间进行处理（见下图）。在第一轮中，确定最佳蛋白质浓度、缓冲液和 pH 条件。在第二轮中，进一步优化洗涤剂。还使用8个载网提供冷凝策略，需要1天时间进行处理，适用于样品量很少的情况，或与侧进样或半自动上样系统（如 Tundra Cryo-TEM）配合使用。 推荐的筛选策略设计用于配合带有自动上样系统和 EPU 多重载网的 Thermo Scientific Vitrobot Mk4 和 Krios、Glacios、Arctica 显微镜一起使用。 |
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