Ambion™ RNase Cocktail™ 是 RNase A (500 U⁄mL) 和 RNase T1 (20,000 U⁄mL) 这两种高纯度核糖核酸酶的混合物,不含 DNase 和切割活性。在适宜降解 RNA 的所有情况下(即质粒小提和核糖核酸酶保护试验)使用 RNase Cocktail。为较大程度提供便利,以 50% 甘油的形式提供 RNase Cocktail。单独使用 RNase A 酶切 RNA,会留下在琼脂糖凝胶上可见并在乙醇中可沉淀的足够大的 RNA 片段。在 C 和 U 残基后使用 RNase A 切割,在 G 残基后使用 RNase T1 切割。因此,与单独使用两种酶的任一种相比,两种酶的混合物导致 RNA 片段大小减小。 质量控制 对 RNase Cocktail 酶混合物的污染性非特异性核酸内切酶、核酸外切酶和蛋白酶活性进行严格检测。在核糖核酸酶保护试验中确定功能。 单位定义: RNase A:一单位 RNase A 是指在 1 mL 体积中于 286 nm 处产生 0.0146 吸光度单位/分钟增量所需的酶量。单位测定条件:100 mM Tris-醋酸盐(pH 值 6.5),1 mM EDTA 和 1 mM 环 2', 3'-CMP。 RNase T1:100 单位 RNase T1 是指使用 60 µg⁄mL 酵母菌总 RNA 作为底物在室温下于 260 nm 处产生 0.01428 单位/min 吸光度增量所需的酶量。 我们现在还提供用于 RNA 结构 ⁄ 功能研究的 Ambion™ RNA 级核糖核酸酶 A、V1 和 T1。有关详细信息,请参见:AM2274 RNase A (1 µg⁄mL),AM2275 RNase V1 (0.1 U⁄µL),AM2283 RNase T1 (1 U⁄µL)。 |
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